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摘要ERCC1基因密碼子118單核苷酸多態性(C118T)的細胞轉染模型,并探討其功能影響。通過定點突變技術構建野生型與突變型ERCC1表達載體,利用威尼德電穿孔儀轉染至HEK293T細胞,驗證轉染效率及SNP位點。功能分析表明,突變型ERCC1顯著降低DNA損傷修復能力并增強順鉑敏感性。結果為ERCC1基因多態性與化療耐藥性關聯研究提供模型支持。引言ERCC1(ExcisionRepairCross-ComplementationGroup1)是核苷酸切除修復(NER)通路...
3-10
摘要微囊化ANPcDNA載體,結合電穿孔技術(威尼德)轉染至高血壓大鼠心肌細胞,探討其對血壓的調控機制。實驗結果顯示,轉染后大鼠血清ANP水平顯著升高,收縮壓降低21.3%,且微囊化載體可延長基因表達至28天。結果表明,該技術通過持續釋放ANP改善血管舒張功能,為高血壓基因治療提供了新策略。引言高血壓是全球心血管疾病的主要危險因素,現有藥物存在靶向性差、副作用顯著等問題。心房鈉尿肽(ANP)具有利尿、擴血管及抑制腎素-血管緊張素系統的作用,但其半衰期短(材料與方法1.實驗動物...
3-10
摘要PCR技術擴增OSMcDNA片段,利用威尼德電穿孔儀將其轉染至HEK293T細胞,結合威尼德紫外交聯儀優化基因組整合效率。通過qRT-PCR和分子雜交技術分析整合位點及轉錄活性,發現OSMcDNA在特定啟動子驅動下高效表達。實驗驗證了PCR介導的基因編輯體系在細胞模型中的應用潛力,為精準基因調控提供技術參考。引言近年來,基因編輯技術的快速發展為解析基因組功能及疾病治療提供了重要工具。OSMcDNA(開放閱讀框特異性標記cDNA)因其結構緊湊且易于修飾的特性,常被用于基因功...
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摘要優化電穿孔與脂質體介導的轉染體系,探究雞胚原始生殖細胞(PGCs)的轉基因效率及分子機制。利用威尼德電穿孔儀結合某試劑納米載體,實現外源基因的高效遞送;通過紫外交聯儀驗證DNA損傷修復路徑對轉基因整合的影響。結果顯示,雙轉染策略顯著提升PGCs存活率至82%,外源基因表達效率達67%。研究為禽類基因編輯技術提供理論支持。引言原始生殖細胞(PGCs)作為生殖系發育的祖細胞,在轉基因動物模型中具有重要應用價值。然而,雞胚PGCs因體外培養難度高、轉染效率低等問題,限制了其在基...
3-8
摘要賈第蟲病毒(Giardiavirus)重組載體,利用威尼德電穿孔儀將綠色熒光蛋白(GFP)基因導入宿主細胞,評估其體內表達效率。實驗結果表明,優化后的載體在宿主細胞中實現了穩定的GFP表達,熒光信號強度較傳統載體提升2.3倍。該方法為寄生蟲基因功能研究及靶向治療提供了高效工具。引言賈第蟲(Giardialamblia)是一種常見腸道寄生蟲,其病毒(Giardiavirus,GLV)因宿主特異性強、基因組緊湊,成為基因傳遞的理想載體。然而,現有載體存在轉染效率低、外源基因表...
3-8
摘要對比脂質體轉染、電穿孔法及病毒載體法對原代人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)的轉染效率、細胞存活率及肌動蛋白表達水平的影響,優化轉染策略。結果顯示,電穿孔法轉染效率高(82.3%),但細胞存活率較低(65.1%);脂質體法綜合表現最佳。研究為內皮細胞基因功能研究提供了方法學參考。引言內皮細胞在血管生成、炎癥反應及屏障功能中發揮關鍵作用,其肌動蛋白骨架的動態調控是研究熱點之一。質粒轉染技術是探究基因功能的核心手段,但內皮細胞因分化程度高、增殖緩慢,轉染效率普遍偏低。目前常用方...
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摘要本研究針對藍氏賈第蟲病毒(GLV)體外轉錄體轉染效率低的問題,系統優化了電穿孔參數、質粒濃度及緩沖液條件。通過調整電壓、脈沖時間和質粒劑量,結合威尼德電穿孔儀與某試劑優化反應體系,顯著提升了轉染效率。實驗結果表明,優化后轉染效率達82.3%,為GLV功能研究提供了可靠方法。引言藍氏賈第蟲(Giardialamblia)是一種全球性分布的腸道寄生原蟲,其感染引起的賈第蟲病對人類健康構成威脅。藍氏賈第蟲病毒(GLV)作為其內源性病毒,可通過調控宿主基因表達影響寄生蟲的致病性。...
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摘要通過威尼德電穿孔儀優化轉染參數,實現外源基因高效導入大鼠肌衛星細胞。實驗結果顯示,電穿孔電壓260V、脈沖時長5ms時轉染效率達68.5%,細胞存活率80%。Westernblot證實目的蛋白穩定表達,表明該方法具有可行性,為肌肉再生研究提供技術支持。引言骨骼肌損傷修復依賴肌衛星細胞的增殖與分化能力,而基因編輯技術是調控其功能的重要手段。傳統化學轉染法存在效率低、細胞毒性強等問題,病毒載體則伴隨生物安全風險。電穿孔技術通過瞬時電場改變細胞膜通透性,具有操作簡便、適用范圍廣...