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摘要：本研究聚焦于電穿孔儀電場(chǎng)參數(shù)對(duì)腫瘤不可逆電穿孔（IRE）的影響，通過(guò)一系列實(shí)驗(yàn)優(yōu)化電場(chǎng)強(qiáng)度、脈沖寬度和脈沖次數(shù)等關(guān)鍵參數(shù)，以提高腫瘤消融效率并減少正常組織損傷。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在特定電場(chǎng)參數(shù)下，腫瘤消融效果好，為腫瘤治療提供了一種新的精準(zhǔn)、高效手段。引言腫瘤治療一直是臨床醫(yī)學(xué)的重要挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)治療方式如手術(shù)切除、放療和化療雖有一定療效，但存在諸多局限。手術(shù)切除受限于腫瘤部位和大小，放療易引發(fā)正常組織損傷，化療則因缺乏特異性導(dǎo)致全身性毒副作用。不可逆電穿孔（IRE）作為一種新...

摘要：本研究旨在構(gòu)建人P2X7基因的真核表達(dá)載體，并通過(guò)轉(zhuǎn)染獲得穩(wěn)定表達(dá)P2X7分子的HEK293細(xì)胞株。以人腦組織P2X7cDNA為模板擴(kuò)增出P2X7基因，插入到真核表達(dá)載體pEGFP-N1中，構(gòu)建重組質(zhì)粒pEGFP-N1/P2X7。通過(guò)G418輔助熒光篩選，成功建立了穩(wěn)定表達(dá)P2X7-EGFP的HEK293細(xì)胞系。該細(xì)胞系的建立為進(jìn)一步研究P2X7離子通道的結(jié)構(gòu)和功能奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。引言P2X7受體是嘌呤能受體家族中的一種重要成員，屬于配體門控離子通道受體。P2X7受體被...

摘要本文旨在探討電轉(zhuǎn)法（電穿孔法）在修飾的信使核糖核酸（modRNA）細(xì)胞轉(zhuǎn)染中的應(yīng)用效果及相關(guān)特性。通過(guò)優(yōu)化電轉(zhuǎn)參數(shù)，實(shí)現(xiàn)了在HEK293和HeLa細(xì)胞系中高效的modRNA轉(zhuǎn)染，并評(píng)估了轉(zhuǎn)染效率、細(xì)胞活力及基因表達(dá)水平。本研究為modRNA在基因功能研究、細(xì)胞治療等領(lǐng)域的進(jìn)一步應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。引言在現(xiàn)代分子生物學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究領(lǐng)域，將外源核酸分子高效地導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)是一項(xiàng)極為關(guān)鍵的技術(shù)手段。其中，modRNA修飾技術(shù)的出現(xiàn)為基因表達(dá)調(diào)控、疾病治療等多方面研究開辟了新的途...

摘要為了建立穩(wěn)定表達(dá)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶6（Glutathioneperoxidase6,GPx6）的真核表達(dá)細(xì)胞系，本研究對(duì)GPx6進(jìn)行基因克隆，構(gòu)建了慢病毒表達(dá)載體，并成功建立了表達(dá)豬源GPx6的CHO-K1細(xì)胞系。該研究成果為GPx6在豬繁殖力提高和精液稀釋液添加劑的應(yīng)用提供了新思路。引言谷胱甘肽過(guò)氧化物酶6（GPx6）作為抗氧化酶家族的重要成員，在生物體內(nèi)具有抗氧化和細(xì)胞保護(hù)的作用。近年來(lái)，GPx6在生殖健康領(lǐng)域的研究逐漸增多，尤其是在豬繁殖力提高方面展現(xiàn)出潛在的應(yīng)用價(jià)...

摘要：本研究旨在探討肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hepatocytegrowthfactor,HGF）基因通過(guò)腎臟電轉(zhuǎn)染方法對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷（ischemia-reperfusioninjury,IRI）的保護(hù)作用。通過(guò)構(gòu)建hHGF基因表達(dá)載體，并利用威尼德電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)將其導(dǎo)入大鼠腎臟，觀察其對(duì)腎功能、組織學(xué)改變及細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果表明，hHGF基因電轉(zhuǎn)染能有效減輕腎缺血再灌注損傷，為腎保護(hù)提供新的策略。引言腎缺血再灌注損傷是臨床腎臟移植、腎臟部分切除術(shù)及主動(dòng)脈瘤手術(shù)等過(guò)程中的常見...

摘要本研究旨在探討山羊精子電穿孔轉(zhuǎn)染外源DNA的最適條件，并評(píng)估其對(duì)精子活力和轉(zhuǎn)染效率的影響。通過(guò)優(yōu)化電場(chǎng)強(qiáng)度、電擊時(shí)間和電擊次數(shù)等參數(shù)，確定了山羊精子電穿孔轉(zhuǎn)染外源DNA的最佳條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在400V、200μs條件下電擊一次，精子活力和轉(zhuǎn)染效率顯著提高，為生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因山羊奠定了基礎(chǔ)。引言基因轉(zhuǎn)移技術(shù)是現(xiàn)代生物技術(shù)的重要組成部分，尤其在動(dòng)物轉(zhuǎn)基因領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。精子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移因其操作簡(jiǎn)便、成本低廉而受到廣泛關(guān)注。其中，電穿孔法作為一種高效的物理方法，能夠通過(guò)產(chǎn)生暫...

摘要：本研究成功構(gòu)建了基于重組酶的大豆基因定點(diǎn)編輯系統(tǒng)，通過(guò)結(jié)合CRISPR/Cas9系統(tǒng)和重組酶技術(shù)，顯著提高了基因編輯的效率和精準(zhǔn)度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該系統(tǒng)能有效實(shí)現(xiàn)大豆基因的定點(diǎn)突變，并減少了脫靶效應(yīng)的發(fā)生。該系統(tǒng)為大豆遺傳改良和分子育種提供了新的技術(shù)手段，具有重要的理論和實(shí)踐意義。引言傳統(tǒng)的育種方法存在周期長(zhǎng)、效率低的問(wèn)題，且難以實(shí)現(xiàn)對(duì)特定基因的精準(zhǔn)編輯。近年來(lái)，基因編輯技術(shù)，特別是CRISPR/Cas9系統(tǒng)的出現(xiàn)，為大豆遺傳改良提供了新的途徑。然而，CRISPR/Ca...

摘要：本研究旨在探討結(jié)核DNA疫苗通過(guò)肌肉注射聯(lián)合電轉(zhuǎn)染方法在增強(qiáng)免疫反應(yīng)中的效果。我們構(gòu)建了結(jié)核DNA疫苗質(zhì)粒，并通過(guò)威尼德電轉(zhuǎn)染設(shè)備對(duì)小鼠進(jìn)行免疫接種。結(jié)果顯示，該方法顯著提高了抗體滴度和T細(xì)胞反應(yīng)。本研究為結(jié)核DNA疫苗的高效遞送提供了新的策略，具有廣闊的應(yīng)用前景。引言結(jié)核病（TB）是一種由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacteriumtuberculosis，Mtb）引起的慢性傳染病，是全球公共衛(wèi)生的重要威脅。盡管現(xiàn)有疫苗卡介苗（BCG）在一定程度上能預(yù)防兒童重癥結(jié)核病，但...